Measure intact active ester
Resolve the NHS ester from hydrolysed 6-FAM rather than relying on fluorescence alone.
Chemical product profile
HONGKUN / PRODUCT DIRECTORYAn amine-reactive 6-FAM active ester for preparing fluorescent conjugates, combining a defined dye isomer with an NHS coupling group whose integrity is essential to labeling performance.
The succinimidyl ester activates the additional carboxyl group of 6-FAM for reaction with amino groups. The fluorescent core remains present, so hydrolysed free dye can still contribute optical signal even when the reactive ester has been lost. Qualification therefore needs chemical identity and active-ester composition alongside fluorescence measurements.
6-FAM SE is used to introduce a fluorescein label onto amine-bearing molecules through amide formation. Research conjugates may include peptides, proteins or amine-functionalized probes. Free dye removal and degree of labeling are properties of the conjugation process and should be assessed in that system. Name the single 6-isomer explicitly and distinguish this reagent from carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester used in different labeling workflows.
An N-hydroxysuccinimide leaving group supports amide coupling; hydrolysis converts the activated group back to a carboxylic acid.
Resolve the NHS ester from hydrolysed 6-FAM rather than relying on fluorescence alone.
Specify the 6-isomer and an isomer-sensitive analytical method.
Agree water or stability controls suited to maintaining the active ester during handling.
Specify single-isomer 6-FAM NHS ester, intact-ester assay, free 6-FAM, positional impurities and moisture-related controls; define the intended amine-bearing substrate.
Confirm container compatibility, closure and net weight for the selected grade and destination. Follow the actual supplier SDS and batch label for storage and transport.
Request the batch COA, SDS and analytical methods covering the agreed purchasing specification. Confirm which supporting chromatograms and application-specific records are available from the selected manufacturer.
No. Hydrolysed free dye can remain fluorescent; check intact ester content.
No. This identity lacks the phenolic acetate groups of that reagent.
Assess conjugation, residual free dye and degree of labeling in the intended system.
琥珀酰亚胺酯将6-FAM的额外羧基活化,便于与氨基形成酰胺键。活化基团水解后,染料骨架仍可能保留荧光,因此仅测荧光不能确认偶联活性。质量审核应同时核查完整活化酯、游离6-FAM和位置异构体。
6-FAM SE通过酰胺连接将荧光素引入带胺基的分子,可用于肽、蛋白或胺基探针的研究性标记。偶联后的游离染料去除和标记程度需要在实际体系中评价。采购时写明单一6位异构体,并与含酚羟基乙酸酯的羧基荧光素二乙酸酯琥珀酰亚胺酯区分。
NHS离去基团用于酰胺偶联;水解后活化位点重新成为羧酸。
分离NHS酯与水解6-FAM,不能只测荧光响应。
注明单一6位结构及能区分异构体的方法。
约定适合活化酯稳定性的水分或稳定性检查。
注明单一6位6-FAM NHS酯、完整酯含量、游离6-FAM、位置杂质及受潮相关控制,并说明待标记胺基底物。
按拟供等级、订购数量和目的地确认包装材质、密封方式及净重。储存与运输条件以实际供应商SDS及批次标签为准。
索取拟供批次COA、SDS及采购规格对应的分析方法;向拟供应商确认相关图谱和应用所需技术文件的可用性。
应检测完整酯含量;水解形成的游离染料同样可产生荧光。
不是,该结构不含酚氧乙酸酯基团。
在目标体系中评价偶联结果、残余游离染料和标记程度。
L’ester active le carboxyle du fluorophore pour former une liaison amide. Après hydrolyse, le colorant libre peut rester fluorescent: la mesure optique ne remplace donc pas le contrôle de l’ester intact.
Ce réactif permet le marquage de molécules aminées, notamment de peptides et de sondes en recherche. Évaluer le conjugué, le colorant libre résiduel et le degré de marquage dans le système choisi. Il se distingue du dérivé diacétate utilisé dans d’autres protocoles de marquage.
Le groupe NHS sert de groupe partant; l’hydrolyse régénère l’acide carboxylique.
Séparer l’ester NHS de la 6-FAM hydrolysée.
Employer une identification discriminant les positions.
Convenir de contrôles d’eau ou de stabilité adaptés.
Définir l’isomère 6, l’ester intact, la 6-FAM libre, l’eau et le substrat aminé visé.
Convenir du contenant, de la fermeture et de la masse nette selon le grade et la destination. Appliquer les conditions de conservation et de transport de la FDS du fournisseur effectif.
Demander le certificat d’analyse du lot, la FDS et les méthodes correspondant à la spécification convenue. Vérifier la disponibilité des chromatogrammes et des données nécessaires à l’application.
Non, le colorant hydrolysé peut encore fluorescer.
Non, les fonctions phénoliques ne sont pas acétylées.
Conjugaison, colorant libre et degré de marquage.
La activación del carboxilo permite formar enlaces amida. El colorante libre generado por hidrólisis puede seguir emitiendo fluorescencia, por lo que el ensayo óptico no sustituye al análisis del éster intacto.
Se emplea en marcaje de moléculas aminadas, incluidos péptidos y sondas de investigación. El conjugado, el colorante libre residual y el grado de marcaje se evalúan en el sistema seleccionado. Debe distinguirse del derivado diacetato utilizado en otros procedimientos de marcaje.
El NHS actúa como grupo saliente; la hidrólisis regenera el ácido carboxílico.
Separar el éster NHS de 6-FAM hidrolizada.
Identificar la posición mediante un método discriminante.
Acordar controles de agua o estabilidad apropiados.
Definir isómero 6, éster intacto, 6-FAM libre, humedad y sustrato amino previsto.
Acordar material del envase, cierre y peso neto para el grado y destino seleccionados. Seguir la FDS del proveedor efectivo y la etiqueta del lote para conservación y transporte.
Solicitar COA del lote, FDS y métodos correspondientes a la especificación acordada. Confirmar la disponibilidad de cromatogramas y documentación específica para la aplicación.
No; el colorante hidrolizado puede seguir fluoresciendo.
No, los grupos fenólicos no están acetilados.
Conjugación, colorante libre y grado de marcaje.
ينشط الإستر الكربوكسيل لتكوين رابطة أميد. قد يبقى اللون الحر الناتج عن التحلل المائي فلورياً، ولذلك لا يغني الاختبار الضوئي عن قياس الإستر السليم.
يستخدم في وسم الجزيئات الحاملة للأمين، ومنها ببتيدات ومجسات بحثية. تقيم المقترنات والصبغة الحرة المتبقية ودرجة الوسم ضمن النظام المختار. يختلف عن مشتق ثنائي الأسيتات المستخدم في مسارات وسم أخرى.
تعمل NHS مجموعة مغادرة، ويعيد التحلل المائي مجموعة الحمض الكربوكسيلي.
فصل إستر NHS عن 6-FAM المتحللة.
تأكيد الموضع بطريقة مميزة للمتماكبات.
الاتفاق على ضوابط ماء أو ثبات مناسبة.
يحدد المتماكب 6 والإستر السليم و6-FAM الحرة والرطوبة والركيزة الأمينية المقصودة.
يتفق على مادة العبوة وإغلاقها والوزن الصافي وفق الدرجة والوجهة. تعتمد شروط التخزين والنقل الواردة في صحيفة سلامة المورد الفعلي وملصق الدفعة.
تطلب شهادة تحليل الدفعة وصحيفة السلامة وطرق الاختبار الموافقة لمواصفة الشراء. يتحقق من توافر الكروماتوغرامات والوثائق الخاصة بالتطبيق لدى المصنع المختار.
لا؛ قد تبقى الصبغة المتحللة فلورية.
لا، مجموعتا الفينول غير مؤستلتين.
الاقتران والصبغة الحرة ودرجة الوسم.